規(guī)格參數(shù)：

產(chǎn)品名稱：中間型鏈霉菌

拉丁文： Streptomyces│intermedius

分離基物： 土壤

提供形式： 凍干物

**等級(jí)： 1

模式菌株： no

培養(yǎng)方法：

培養(yǎng)基 832

生長(zhǎng)條件 30℃

存儲(chǔ)條件 真空冷凍干燥法

1 恒溫培養(yǎng)箱：36±1℃。

2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。

3 接種針。

4 顯微鏡。

5 超凈工作臺(tái)。

6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。

7 天平：感量0.01g。

8 菌釜。

9 培養(yǎng)皿（直徑為90mm）、試管，經(jīng)121℃、30分鐘菌。

10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng)，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍廣的微生物保存法。

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 放線菌孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備

種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為種子，把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。

SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液（5×，還原）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

TBS (Tris Buffered Saline, pH7.2, 10x)（可提供標(biāo)記服務(wù)）

AuraStain SP鼠/兔IHC試劑盒（可提供標(biāo)記服務(wù)）

TMB底物顯色試劑盒（可溶型）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

RIPA裂解液（弱）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

藍(lán)色預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)(20-120 kDa)（可提供標(biāo)記服務(wù)）

SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液（5×，非還原）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

TBST (Tris Buffered Saline Tween-20, pH7.5, 10x)（可提供標(biāo)記服務(wù)）

RIPA裂解液（強(qiáng)中弱套裝）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

考馬斯亮藍(lán)染色液（常規(guī)法）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

SDS-PAGE凝膠電泳緩沖液 (10x)（可提供標(biāo)記服務(wù)）

AuraStain SP鼠IHC試劑盒（可提供標(biāo)記服務(wù)）

麗春紅染色液（可提供標(biāo)記服務(wù)）

NP-40裂解液（可提供標(biāo)記服務(wù)）

考馬斯亮藍(lán)染色脫色液（常規(guī)法）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

SDS-PAGE凝膠轉(zhuǎn)膜緩沖液(10x)（可提供標(biāo)記服務(wù)）

蛋白示蹤上樣緩沖液（還原，5×）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

SDS裂解液（可提供標(biāo)記服務(wù)）

G250蛋白快速染色試劑（可提供標(biāo)記服務(wù)）

1.5M Tris-Cl (pH8.8)（可提供標(biāo)記服務(wù)）

AuraStain SP兔IHC試劑盒（可提供標(biāo)記服務(wù)）

蛋白示蹤上樣緩沖液（非還原，5×）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

0.5M Tris-Cl (pH6.8)（可提供標(biāo)記服務(wù)）

Western Blot轉(zhuǎn)膜液（粉劑）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

30% Acr-Bis (29:1)（可提供標(biāo)記服務(wù)）

1M Tris-Cl (pH8.0)（可提供標(biāo)記服務(wù)）

Biotin標(biāo)記山羊抗鼠IgG（IHC工作液）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

Western Blot一抗稀釋液（可提供標(biāo)記服務(wù)）

細(xì)胞漿/核/膜蛋白抽提試劑盒（可提供標(biāo)記服務(wù)）

SDS-PAGE濃縮膠緩沖液（4×）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

Tween 20（可提供標(biāo)記服務(wù)）

Biotin標(biāo)記山羊抗兔IgG（IHC工作液）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

Western Blot封閉液1（BSA, pH7.5）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

白抽提試劑（可提供標(biāo)記服務(wù)）

SDS-PAGE分離膠緩沖液（4×）（可提供標(biāo)記服務(wù)）

細(xì)胞培養(yǎng)懸液氧化應(yīng)激活性氧 ROS 光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒測(cè)定

動(dòng)物細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧 ROS 光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒測(cè)定

體液氧化應(yīng)激活性氧 ROS 魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑測(cè)定

血液氧化應(yīng)激活性氧 ROS 魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒測(cè)定

細(xì)胞樣品細(xì)胞色素C氧化酶活性染色試劑盒 測(cè)定

冰凍切片乙酰膽堿脂酶活性染色試劑盒測(cè)定

細(xì)胞乙酰膽堿脂酶活性染色試劑疫測(cè)定

全組織蔗糖酶活性染色試劑盒 測(cè)定

冰凍切片蔗糖酶活性染色試劑盒測(cè)定

細(xì)胞蔗糖酶活性染色試劑盒測(cè)定

特殊石蠟切片磷脂尼羅紅 NileRed 間接熒光染色試劑盒測(cè)定

冰凍切片甘油三脂脂酶法格莫瑞 Gomori 染色試劑盒 測(cè)定

特殊石蠟切片甘油三脂脂酶法格莫瑞 Gomori 直接染色試劑盒 測(cè)定

特殊石蠟切片甘油三脂脂酶法格莫瑞 Gomori 間接染色試劑盒測(cè)定

細(xì)胞甘油三脂脂酶法格莫瑞 Gomori 染色試劑盒 測(cè)定

冰凍切片總膽固醇 酯酶法 菲律賓 FILIPIN 熒光染色試劑盒測(cè)定

特殊石蠟切片總膽固醇 酯酶法 菲律賓 FILIPIN 熒光直接染色試劑盒 測(cè)定

特殊石蠟切片總膽固醇 酯酶法 菲律賓 FILIPIN 熒光間接染色試劑盒 測(cè)定

細(xì)胞總膽固醇 酯酶法 菲律賓 FILIPIN 熒光染色試劑盒 測(cè)定

冰凍切片總游離膽固醇菲律賓 FILIPIN 熒光染色試劑測(cè)定

特殊石蠟切片總游離膽固醇菲律賓 FILIPIN 熒光直接染色試測(cè)定

特殊石蠟切片總游離膽固醇菲律賓 FILIPIN 熒光間接染色試劑測(cè)定

細(xì)胞總游離膽固醇菲律賓 FILIPIN 熒光染色試測(cè)定

細(xì)胞游離膽固醇毛地黃皂苷法 DIGITONIN 舒爾茨染色試測(cè)定

冰凍切片總膽固醇舒爾茨染色試劑盒 定

細(xì)胞游離膽固醇毛地黃皂苷法 DIGITONIN 高氯酸萘醌 PAN 染測(cè)定

冰凍切片總膽固醇高氯酸萘醌 PAN 染色試劑測(cè)定

特殊石蠟切片總膽固醇高氯酸萘醌 PAN 間接染色試定

細(xì)胞總膽固醇高氯酸萘醌 PAN 染色試劑定

冰凍切片中性脂質(zhì)油紅O染色試劑盒 測(cè)定

特殊石蠟切片中性脂質(zhì)油紅O間接定

細(xì)胞中性脂質(zhì)油紅O染色試劑定

冰凍切片中性脂質(zhì)蘇丹黑染色

特殊石蠟切片中性脂質(zhì)蘇丹黑直接

特殊石蠟切片中性脂質(zhì)蘇丹黑定

細(xì)胞中性脂質(zhì)蘇丹黑染色試

冰凍切片中性脂質(zhì)尼羅紅染色試劑盒

中間型鏈霉菌特殊石蠟切片中性脂質(zhì)尼羅紅直接染

特殊石蠟切片中性脂質(zhì)尼羅紅間接染色

細(xì)胞中性脂質(zhì)尼羅紅染色試劑盒定

冰凍切片膽色素普歇 Pouche定

基本概念：

(1)菌群：由多種合組成的相對(duì)穩(wěn)定的群體，具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸他們之間的過(guò)渡類型。

(2) 菌屬：菌種的上分類，通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬，如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。

(3)是基本的分類單位，通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類群體，與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異；當(dāng)涉及到保存時(shí)，菌種是指的種子（用來(lái)長(zhǎng)期保存）資源。

(4) 菌型：同一菌種的不同，在某些方面存在較小差異的為同一菌型，通常一個(gè)菌種內(nèi)的可以分為多種不同的菌型。

(5) 菌株：由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代，一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。